（2）肟异羟酯酸铁试验：取香豆素少许，加酒精1ml溶解加6滴盐酸羟胺的饱和乙醇液混匀后加入6滴KOH的饱和乙醇液，使其显强碱性再转入试管中加热10分钟左右（有气泡产生），冷却加5%盐酸使呈弱酸性（Ph6左右），倾入比色盘或蒸发皿中，沿器壁滴10tCl3溶液，约半分钟后紫色出现或加深（后消失）。（此反应试酯、内酯、香豆精及其苷类。但用中草药浸液试验反应结果不太明显）。
（七）氰苷的鉴别
取苦杏仁4~5粒，研碎，置50ml锥形瓶中加入3ml。
5%硫酸溶液，充分混合，塞好，进行以下（1）、（2）反应。
（1）苦味酸钠试验：取滤纸条先滴加饱和苦味酸液侵润，稍干后，再滴加10%碳酸钠1~2滴润湿，干后，悬于上述锥形瓶中，在水浴上加热10分钟，滤纸渐变为橙色或砖红色。
（2）取滤纸条先滴加3~4滴愈创木树酯醇溶液润湿，干后，再滴加1%硫酸钠液3~4滴润湿后，悬于同一锥形瓶中，放置，滤纸条渐变为鲜兰色（放置过入色渐褪）。
（3）亚铁氰化铁反应（普鲁士兰反应）：另取苦仁一粒研碎，放入试管中，加水1~2滴润湿（切勿过量），立即用已被10%NaOH试剂1滴湿润的滤纸条悬于管口置50℃水浴上约10分钟，将滤纸取出，于滤纸上加10tSO4液1滴，加10%HCl1~2滴及1tCl3，试液1滴即显兰色。
四、挥发油的定性鉴别
1．外观性状：
（1）取各种挥发油（松节油、薄荷油、丁香油、陈皮油及桂皮油）观察其色泽，是否有特殊香气，及辛辣烧灼味感。
（2）挥发性：取滤纸屑一小块，滴加薄荷油一滴，放置2小时或微热后观察滤纸上有无清晰的油迹（与菜油作对照实验）。
（3）pH检查：（检游离酸或酚类）。
取样品一滴加乙醇5滴，以预先用蒸馏水湿润的广泛pH试纸进行检查，如显酸性，示有游离的酸或酚类化合物，剩下的样品乙醇液供下面（7）（8）试验用。
（4）FeCl3反应（检酚类）：
取样品一滴，溶于1ml乙醇中，加入1%得FeCL3醇液1~2滴，如显蓝紫或绿色，示有酚类。
（5）苯肼试验（检酮、醛类）
31
取2，4—二硝苯肼试液0.5~1ml，加1滴样品的无醛醇溶液，用力振摇，如有酮醛化合物，应析出黄一橙红色沉淀，如无反应，可放置15min后再观察之。
（6）荧光素试验法：
将样品乙醇液滴在滤纸上，喷酒0.05%荧光素水溶液，然后趁湿将纸片暴露在5%Br2/Col4蒸汽中，含有双键的萜类（如挥发油）呈黄色；背景很快转变为浅红色。
（7）香荚醛——浓硫酸试验：
取挥发油乙醇液一滴于滤纸上，滴以新配制的0.5%香荚醛的浓硫酸乙酸液，呈黄色、棕色、红色或兰色反应。
五、鞣质类化合物的鉴别
1．检品溶液的制备：
取五倍子（含可水解鞣质），儿茶（含缩合鞣质），没食子酸（鞣质水解产生伪鞣质）少量（约0.1克）分别置大试管中，加蒸馏水约10ml，加热煮沸，过滤，滤液作以下试验：
2．鞣质的一般反应（鞣质与伪鞣技的区别鉴定）
（1）感观试验：取制备的鞣质和伪鞣质溶液，尝其味，并以石蕊试纸检查溶液是否呈酸性反应。
（2）三氯化铁反应：取制备的鞣质溶液（五倍子溶液或儿茶溶液）及伪鞣溶液（食子酸溶液）各1~2ml ，分别加入三氯化铁试液,鞣质产生绿色或兰黑色反应或沉淀;伪鞣质产生兰色反应。
（3）沉淀蛋白反应：取鞣技溶液及伪鞣质溶液各1~2ml，分别入明胶溶液数滴，鞣技立刻产生沉淀反应。
（4）生物碱反应：取鞣质溶液及伪鞣质溶液各1~2ml，分别滴加0.1%咖啡碱水溶液，鞣质液产生沉淀反应，伪鞣质不产生沉淀反应。
3．可水解鞣和缩合鞣质的区别鉴定
（1）鞣红反应：取五倍子浸液（含可水解鞣质），儿茶浸液（含缩合鞣质）各2ml，分别加盐酸0.5ml，加热煮沸30分钟左右放冷。可水解鞣质不发生沉淀，缩合鞣质有红色沉淀产生。
（2）三氯化铁反应：取五倍子浸液及儿茶浸流各1~2ml，分别加入三氯化铁试液数滴，可水解鞣质显兰色或黑兰色反应，缩合鞣质显黑绿色反应。
32
（3）溴水反应：取五倍子浸液用儿浸液各1~2ml，分别加入溴水数滴，可水解鞋帽质不产生沉淀反应，缩合鞣质产生沉淀。
（4）石灰水反应：取五倍子浸液及儿茶浸液各1~2ml，分别加入新制石灰水数滴，可水解鞣质显青灰色沉淀，缩合鞣质显棕色沉淀。
（5）醋酸溶液中与醋酸铅反应：取五倍子浸液及儿茶浸液各1~2ml，分别加醋酸液数滴，摇匀后再分别滴加醋酸铅溶液数滴，可水解鞣质产生絮状沉淀，缩合鞣质无沉淀产生。
附录一 中草药化学成分检出试剂配制法
一、生物碱沉淀试剂：
1．碘化铋钾（Dragendorff）试剂：取次硝酸铋3g溶于30%硝酸（比重1.18）17ml中，在搅拌下慢慢加碘化钾浓水溶液（27克碘化钾溶于20ml水），静置一夜，取上层清液，加蒸馏水稀释至100ml。
附：改良的碘化铋钾试剂：
甲液：0.85g次硝酸铋溶于10ml冰醋酸，加水40ml。
乙液：8g碘化钾溶于20ml水中。
溶液甲和乙等量混合，于棕色瓶中可以保存较长时间，可作沉淀试剂用，如作层析显色剂用，则取上述混合液1ml与醋酸2ml，混合即得。
目前市场上碘化铋钾试剂可直接供配制：7.3g碘化铋钾，冰醋酸10ml，加蒸馏水60ml。
2．碘化汞钾（Mayer）试剂：氯化汞1.36g和碘化钾5g各溶于20ml水中，混合后加水稀释至100ml。
3．碘一碘化钾（Wagner）：试剂：1g碘化钾液于50ml，加热，加2ml醋酸，再用水稀释至100ml。
4．硅钨酸试剂：5g硅钨酸溶于100ml水中，加盐酸少量至pH2左右。
33
5．苦味酸试剂：1g苦味酸溶于100ml水中。
6．鞣酸试剂：鞣酸1g加乙醇1 ml溶解后再加水至10ml。
7．碱酸铈——硫酸试剂：0.1g硫酸铈混悬于4ml水中，加入1g三氯醋酸，加热至沸，逐滴加入浓硫酸至澄清。
二、苷类检出试剂：
（一）糖的检出试剂：
1．碱性酒石酸铜（Fehiling）试剂：本口分甲液与乙液，应用时取等量混合。
甲液：结晶硫酸酮6.23g，加水至100ml。
乙液：酒石酸钾钠34.6g，及氢氧化钠10g，加水至100ml。
2．ɑ-萘酚（Molisch）试剂。
甲液：ɑ-萘酚1g，加75%乙醇至10ml。
乙液：浓硫酸
3．氨性硝酸银试剂：硝酸银1g，加水20ml溶解，注意滴加适量的氨水，随加随搅拌，至开始产生的沉淀将近全溶为止，过滤。
4．ɑ-去氧糖显色试剂
（1）三氯化铁冰醋酸（Keller-Kiliani）试剂
甲液：1%三氯化铁溶液0.5ml，加冰醋酸至100ml。
乙液：浓硫酸。
（2）占吨氢醇冰醋酸（Xanthydrol）试剂：10mg占吨氢醇溶于100ml冰醋酸（含1%的盐酸中）
（二）酚类
1．三氯化铁试剂：5%三氯化铁的水溶液或醇溶液。
2．三氯化铁一铁氰化钾试剂：
34
甲液：2%三氯化铁水溶液
乙液：1%铁氰化钾水溶液
应用时甲液、乙液等体积混合或分别滴加。
3、4一氨基氨替比林一氨氰化钾（Emerscn）试剂：
甲液：2%4-氨基安替比林乙醇液
乙液：3%铁氰化钾水溶液，（或用0.9%4-氨基安替比林和5.4%铁氰化钾水溶液）。
4．重氮化试剂：本试剂系由对硝基苯胺和亚硝酸钠在强酸下经重氮化作用而成，由于重氮盐不稳定很易分解，所本试剂应临用时配制。
甲液：对硝基苯胺0.35g，溶于浓盐酸5ml，加水至50ml。
乙液：亚硝酸钠5g，加水至50ml
应用时取甲、乙液等量在冰水浴中混合后，方可使用。
5．Gibb试剂：
甲液：0.5%2，6-二氯苯醌-4氯亚胺的乙醇溶液。
乙液：硼酸一氯化钾一氢氧化钾缓冲液（pH9.4）。
[注]试剂配制法中：1.水是指蒸馏水；2.不指出溶剂的即为水溶液；3.醇指95%；4.试剂配制后应澄清，如不澄清可过滤。
（三）内酯、香豆素类
1．异羟肟酸铁试剂
甲液：新鲜配制的1N羟胺盐酸盐（M=69.5）的甲醇液。
乙液：1.1N氢氧化钾（M=56.1）的甲醇液
丙液：三氯化铁溶于1%盐酸中的浓度为1%的溶液。
应用时甲、乙、丙三液体按次序滴加，或甲、乙两液混合滴加后再加丙液。
2．4-氨基安替比林一铁氰化钾试剂（见二一（二）-3）。
35
