一、生物碱的鉴别
1．检品溶液的制备：
取粉碎的植物样品约2g，加蒸馏水20~30ml，并滴加数滴盐酸，使呈酸性。在60℃水浴上加热15分钟，过滤，滤液供作以下试验。
2．生物碱类成分的鉴别：
生物碱类成分（除有少数例外）均与多种生物碱沉淀试剂在酸性溶液（水液或稀醇液）中产生沉淀反应。操作如下：
（1）取上备酸水浸液四份（每份1 ml左右即可）,分别滴加碘-碘化钾﹑碘化汞钾试剂﹑碘化铋钾试剂﹑硅钨酸试剂。若四者均有或大多有沉淀反应，表明该样品可能含有生物碱，再进行下项试验，进一步识别。
（2）取上备其余酸水浸液，加Na2CO3溶液呈碱性，置分液漏斗中，加入乙醚约10ml振摇，静置后分出醚层，再用乙醚3ml，如前萃取，合并醚液。将乙醚液置分液漏斗中，加酸水液10ml振摇，静置分层，分出酸水液，再以酸水液5ml如前提取，合并酸水液，如此酸提液四份，分别作以下沉淀反应。
a．碘化汞钾试剂（Mayer试剂）：酸水提液滴加碘化汞钾试剂，产生白色沉淀。
b．碘化铋钾试剂（Dragendorff试剂）：酸水提液滴加碘化铋钾试剂，产生桔红色或红棕色沉淀。
c．碘-碘化钾试剂（Wagner试剂）：酸水提液滴加碘-碘化钾试剂，产生棕色沉淀。
d．硅钨酸试剂：酸水提取液滴加硅钨酸试剂产生淡黄色或灰白色沉淀。
此酸水提液与以上四种试剂均（或大多）产生沉淀反应，即预示本样品含有生物碱。
（3）备注：以上（1）、（2）沉淀反应结果：沉淀的多少以“+++”，“++”，“+”表示，无沉淀产生则以“—”表示。若（1）项试验全呈负反应，可另选几种生物碱沉淀试剂（可参考有关资料）进行试验，若仍为负反应，则可否定样品中有生物碱的存在，不必再进行（2）项试验。
二、苷类的鉴别
（一）苷的一般鉴别反应
1．检品溶液的制备：
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中草药水浸液：取中草药碎块或粉末2g，加蒸馏水约20ml 70℃±水浴，浸渍10分钟，过滤，滤液供鉴别用。
中草药醇浸液：取中草药碎块或粉末少许于试管中，加乙醇10ml，在温水浴上浸渍10分钟，过滤，滤液供鉴别用。
2．鉴别试验：
（1） -萘酚试验（Molish）反应 取醇浸液1ml，加10% -萘酚醇液1滴，摇匀，沿管壁缓慢加入浓H2SO4 10滴，不振摇，观察两液介面间是否出现紫红色杯（此反应检识糖、苷类化合物，反应较灵敏。若有微量滤纸纤维或中草药粉末存在于溶液中，都能产生上述反应，故在过滤时应加以注意）。
（2）水解反应：
取水浸液3ml于试管中，加10%HCl 1ml在沸水浴上加热20分钟，观察是否有絮状沉淀产生？
（3）碱性酒石酸铜（斐林试剂Fehling’s test solution）试验
取水浸液2ml，加入新配制的斐林试剂（甲+乙等量混合）1ml，在沸水浴上加热数分钟，如产生红色的氧化亚铜沉淀，则行过滤，滤液中加10%HCl调成酸性，置水浴上加热10分钟。进行水解，如有絮状沉淀则滤去。然后用10%NaOH中和，再加入斐林试剂1ml，仍置沸水浴上加热5分钟，观察是否有黄色，砖红或棕色沉淀产生？（此反应试多糖，苷类）从反应结果说明供试中草药中是否含有苷？（此试验法亦可采用同体积同浓度的中草药浸液两份，一份先经酸水解过滤碱化后，另一份再同时进行如上的还原反应，对比生成的氧化亚铜量，两份是否有差异来判断，具体方法见系统预试实验）。
注：中草药对苷的一般鉴别是正反应，还可进一步作个别苷类的鉴定。具体方法如后。
（二）蒽苷的鉴别
1．检品溶液的制备：
取大黄粉末2克，加乙醇20ml，在沸水浴上回流浸提10分钟，过滤供鉴别用。
2．鉴别试验：
（1）与碱成盐显色反应（Borntrager反应）：取1ml乙醇提取液，加入1ml 10% NaOH溶液，如产生红色反应，加入少量30%过氧化氢液，加热后红色不褪，加酸使呈酸性时，则红色消褪再碱化又出现红色。
注：或取大黄粉末少许，置小试管中，加水1~2ml，加浓H2SO4 2—3滴，置水浴中加热10
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分钟，冷却，加乙醚1—2ml振摇。用吸管吸取醚液（黄色）于另一洁净试管中，加入NaOH试液1ml振摇，则醚层应褪为无色，碱层（下层）为红色，示有蒽醌类成分存在，如供试的中草药在以上试验中碱水层仅现黄色，可分出碱水溶液，置试管中，加30%H2O2溶液1~2滴，在沸水浴中加热数分钟，混液如能转为橙红色，说明中草药中可能有蒽酚类成分存在。
（2）升华试验：取大黄粉末少许，置载玻片上，玻片两端各放短木棍一小段，然后另取一洁净载玻片，放置于小棍上，注意勿触及下面粉末。然后移置在三足架的铁纱网上小心加热（勿使粉末炭化）至玻片上有升华物凝结为止，取下盖片，使升华物面向上，放置于显微镜下观察，可见多数黄色针晶或羽毛状晶体（蒽醌衍生物）。此晶体遇碱液呈红色。
（3）园形滤纸层析：
样品：大黄醇浸液
显色：1）于自然光下观察色带
2）于紫外光下观察荧光环
3）氨熏，观察是否出现红色环，再置uv下观察荧光环
4）喷0.5%MgAC2甲醇液，于90℃烘5分钟，是否出现橙红或紫红色环。
（三）黄酮苷的鉴别
1．检品溶液的制备：
取槐花米约1克压碎于试管中加乙醇10~20ml在水浴上加热20分钟。过滤，滤液供以下试验。
2．鉴别试验：
①取醇浸液2ml，加浓盐酸2~3滴及镁粉少量，放置（或于水浴中微热），产生红色反应。
②取醇浸液1ml，滴加pbAC2溶液数滴，产生黄色沉淀。
③纸片法：
将醇浸液滴于滤纸上，分别进行以下试验：
①先在紫外灯下观察荧光，然后喷1%AlCl3试剂，再观察荧光是否加强。
②氨熏后出现黄色，棕黄色荧光斑点。
与氨接触而显黄色，或者原呈黄色，但与氨接触后黄色加深，滤纸片离开氨蒸气数分钟，黄
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色或加深后的黄色又消褪。
③喷以3tCl3乙醇溶液，出现绿、兰或棕色斑点。
（四）强心苷的鉴别
1．检品溶液的制备：
取夹竹桃叶碎块粉末3g，于100ml锥形瓶中加70%乙醇40ml，水浴上浸煮5分钟，放冷，过滤，滤液（或经处理后——方法参照注二）供鉴别用。
[注1]：强心苷的试验都是在较强的碱性条件下进行，如果样品中含有蒽醌，也具有红色反应，防碍检查，因此在检查前需先检查有无蒽醌类成分，若有则应先将其除去，即将乙醇浸液在水浴上蒸发，残渣加CHCl3热溶后过滤，CHCl3液用1%NaOH液振摇，去除蒽醌后，CHCl3液供鉴别用。
[注2]：夹竹桃叶或毛地黄叶绿素，常使醇提液带较深的绿色，影响反应的进行。故需将叶绿素除去，具体方法如下：
乙醇浸提液在水浴上挥去大部分乙醇（不让乙醇挥尽），再加水适量，使含醇量约20%左右，稍热后即放冷，过滤，滤液即可供试验用，或将滤液在水浴上浓缩至糖浆状，加入95%乙醇10ml溶解再供试验用。
2．鉴别试验：
（1）三氯化铁冰醋酸反应（Keller-Kiliani反应）：取醇提液或经处理后的CHCl3或醇液1ml，水浴上蒸干，残渣溶于冰醋酸2ml中，加入1tCl3乙醇液1滴，混合均匀，倾入干燥小试管中，再沿管壁缓慢加入等体积浓硫酸，静置，二液交界处显棕色（苷元），渐变为浅绿，兰色，最后上面醋酸层全呈兰色或兰绿色（ -去氧糖）。
（2）碱性3.5-二硝基苯甲酸反应（Kedde反应）：取1ml醇浸提液，加入碱性3.5-二硝苯甲酸试剂3~4滴，产和红色或红紫色反应。
（3）亚硝酰铁氰化钠反应（Legal反应）：取1ml醇浸提液或经处理后的CHCl3或醇液在水浴上蒸干，用1ml吡淀溶解残渣，加入0.3%亚硝酰铁氰化钠溶液4~5滴，混匀，再加入NaOH饱和乙醇液1—2滴，是否呈现红色（若结果不明显可另一取一份供试液如上操作，最后加NaOH饱和乙醇液0—5ml，观察二液交界面有无红色）。
（4）碱性苦味酸（Baljet反应）
取样品醇液1ml，加入碱性苦味酸试剂（苦味酸饱和水液与5%NaOH水液等量混合）数滴，呈现橙或橙红色。
（五）皂苷的鉴别
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1．检品溶液的制备：
1）取皂角碎块1g于大试管（或小烧杯）中，加蒸馏水15ml，于30~90°水浴上浸渍15分钟后过滤，滤液供鉴别用。
2）取薯蓣碎块0.5g加上法同样制备得薯蓣水浸液。
3）取薯蓣碎块0.5g于大试管或小锥形瓶中加95%乙醇10ml于水浴上温浸15分钟，滤液供鉴别。
2．鉴别试验：
（1）溶血试验：取滤纸片一小块，于小心处滴加皂角浸液一滴，待干后于同处再滴加一滴，如是反复操作至滴加数滴，干燥后无喷雾血球试液（取牛血、羊血或兔血一份，用玻棒或棉签搅和，除去凝集的血蛋白，加pH7.4磷酸盐缓冲液一份稀释即得），数分钟后观察在红色的背底中是否出现无红色的黄色（或透明）斑点（中心处皂解浸液原点）。（本反应亦可在试管中进行，血球试液中草药浸液中的皂苷溶解后，血球液由浑浊变为澄明。此外还可在载玻片上进行，并在显微镜下观察血球破裂溶解前后的状况）。
（2）泡沫试验：薯蓣浸液，皂角浸液各2ml，分别置于试管中。用力振摇一分钟后放置，在10分钟内观察二管是否都有持久性泡沫产生？
（3）醋酐浓硫酸试验（Liebermann-Burchard反应），皂角浸液5ml，于蒸发皿中在水浴上蒸干，加入1ml醋酐使其溶解，滴于干燥比色盘中，从边沿缓缓滴加浓硫酸1滴，观察颜色变化。
另取薯蓣浸液5ml，置于蒸发皿中，在水浴上蒸干，加入1ml醋酐溶液，并倾入比色盘中，（试管）沿管壁加入几滴浓硫酸，观察界面间是否有紫红色环产生？
（4）氯仿—浓硫酸试验（Salkowski反应）：取薯蓣醇浸液2ml，在水浴上蒸干，有氯仿1ml溶解，转入干燥小试管中，沿壁小心加浓硫酸1ml，氯仿层显红或兰色，硫酸层有绿色荧光，示含甾体皂苷。
（六）香豆精苷的鉴别
1．检品溶液的制备：
取秦皮2克，加入乙醇20ml，在水浴上回流10分钟，趁热过滤，滤液供鉴别用。
2．鉴别试验：
（1）内酯化合物的开环与闭环反应：取2ml乙醇浸出液，加1—2ml 1% NaOH，于沸水浴中煮沸3分钟，冷却后加新配制的重氮化试剂1~2滴，显红色。
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