高效液相色谱仪验证方案与报告,详细,其他设备验证可以参考
对照品溶液的制备 取芍药苷对照品适量,精密称定,加甲醇制成每lml含40μg的溶液,即得。
供试品溶液的制备 取乌鸡白凤丸小蜜丸,研细,取约5g,精密称定,精密加入30%乙醇25ml,称定重量,时时振摇,静置24小时,超声处理30分钟(功率300W,频率50kHz),放冷,再称定重量,加30%乙醇补足减失的重量,摇匀,滤过。精密量取续滤液5ml,通过D101型大孔吸附树脂柱(内径1.5cm,柱高12cm),用30%乙醇100ml洗脱,收集洗脱液,蒸干,残渣用水5ml分次使溶解,转移至25m1量瓶中,容器用甲醇适量多次洗涤,洗液并入同一量瓶中,加甲醇至刻度,摇匀,即得。 测定法 分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各20μl,注入液相色谱仪,测定,即得供试品中芍药苷(C23H28O11)的含量。
标示含量%=[(Ar·C·S)/(Ai·Wr·1000)]×100% 式中:Ar、AI---分别为样品与对照品峰面积; C----为对照品浓度。 Wr---为样品重量(g);
S----为供试品稀释倍数。
样品重(g):(1) (2) (3) 样品与对照品峰面积见图谱。 计算:标示含量(1)
标示含量(2) 标示含量(3)
计算相对偏差 允许偏差≤3.0%。 结论:
试验者: 日期: 年 月 日 复核者: 日期: 年 月 日 (五) 再确认
1、线路连接:检查线路,接地等情况。 2、仪器维护:清洁仪器内部和外部。
3、检查:色谱柱参数是否降低,润滑是否良好。 4、功能验证: 4.1 流量
用比重瓶收集一定时间的流动相比较流量是否和设定值一致,如不一致则调整。 4.2 紫外检测器性能
4.2.1 将仪器各部联好,紫外检测器波长调到250nm,流动相为甲醇,流速为1.0ml/min,稳定后记录基线30~40分钟,基线飘移≤±5.0×10-4AU/hr,噪声≤±1.0×10-4AU。 4.2.2 重复性
精密量取二甲苯和苯适量,置棕色量瓶中,加甲醇使溶解并稀释成每1ml含上述两
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