第2期
2014年2月
第14卷
中国食品学报
JournalofChineseInstituteofFoodScienceandTechnology
Vol．14No．2Feb．2014
高产果胶酶菌株的筛选鉴定及其发酵条件研究
陈勇强
严
芬
叶秀云
李仁宽
陈冬梅
林
娟
*
（福州大学生物科学与工程学院
摘要
福州350116）
采用观察透明圈与液态发酵测酶活相结合的方法，从腐烂的水果中筛选获得1株果胶酶产生菌G1。通
过形态观察与18SrDNA序列分析，鉴定菌株G1为黑曲霉。对G1菌株的发酵工艺进行优化，确定最佳培养基配方（g/L）：桔皮粉32，麸皮10，（NH4）2SO422，Na2HPO4·12H2O8.4，KH2PO41.4，MgSO4·7H2O1.0，CaCl20.1，··FeSO47H2O0.1，ZnSO47H2O0.1，培养基初始pH6.5；最佳发酵条件是：装液量50mL/250mL，转速180r/min，接种量9%（体积分数），32℃培养7d。在此条件下，果胶酶活力达到270.4U/mL，比优化前提高了8.7倍。关键词文章编号
果胶酶；黑曲霉；筛选鉴定；发酵工艺
1009-7848（2014）02-0138-08
果胶酶（pectinase）是指能催化分解果胶质的
1
1.1
材料与方法
试验材料菌种
来源于果园土壤与腐烂水果。
果胶、半乳糖醛酸，购自Sigma
主要试剂
1类酶的总称，包括原果胶酶、聚半乳糖醛酸酶、
果胶裂解酶和果胶酯酶等[1]。它在食品工业中应用非常广泛，如果汁澄清，提高果蔬出汁率，改善酒的色泽，增加酒的香气，提取生物活性功能成分，茶叶发酵的预处理等
[2-3]
1.1.1
1.1.2
公司；基因组DNA提取试剂盒、TaqDNA聚合酶、
。此外，果胶酶在饲料、环
250bpDNAmarker，购自TaKaRa公司；其余试剂
均为分析纯级。
保、纺织、发酵和洗涤等行业也有重要应用价值[4-6]。果胶酶主要来源于微生物的代谢产物，现已发现
1.1.3培养基
40多种微生物能产果胶酶，有曲霉属、青霉属、镰
孢属、克鲁维氏酵母以及某些兼性厌氧细菌等[7-9]。
利用微生物发酵生产果胶酶，因具有产能大、周期短、质量稳定、经济效益高等优点，故微生物是生产果胶酶的优良生物资源。我国是微生物资源大国，而目前国内生产的果胶酶酶活不理想，产量小，不能满足国内市场日益增长的需要。筛选果胶酶高产菌株及优化其发酵产酶的条件，是目前亟待研究和解决的问题。本文从自然界中筛选果胶酶高产菌株，并对其产酶培养基和发酵条件进行研究，以期为果胶酶的发酵生产打下基础。
1）富集培养基（g/L）：果胶2，（NH4）2SO43，Na2HPO4·12H2O4.2，KH2PO41.4，FeSO4·7H2O
·0.01，MgSO47H2O0.5，pH自然。
2）筛选培养基：在富集培养基基础上添加2%的琼脂。
3）查氏培养基[10]（g/L）：NaNO32，K2HPO41，
··KCl0.5，MgSO47H2O0.5，FeSO47H2O0.01，蔗糖
30，琼脂20，pH自然。
4）马铃薯培养基[10]（g/L）：马铃薯200，葡萄糖20，pH自然。固体马铃薯培养基（PDA）加琼脂20g。
5）基础发酵培养基（g/L）：桔皮粉12，（NH4）2SO4
··10，Na2HPO412H2O8.4，KH2PO41.4，MgSO47H2O
1.0，CaCl20.1，FeSO4·7H2O0.1，ZnSO4·7H2O0.1，pH自然。
1.2试验方法
1.2.1产果胶酶菌种的筛选初筛：取10g采集
样品于90mL无菌生理盐水中振荡30min，制成
收稿日期：2013-02-24
基金资助：福建省自然科学基金项目（2011J01218）；福建
省教育厅科技项目（JA10022）
作者简介：陈勇强，男，1986年出生，硕士生通讯作者：林娟
