医学分子生物学复习思考题及答案(8)

2025-09-10

合物的形成,增强翻译过程。如生长因子能增加eIF-4E磷酸化,于是翻译加快,促进细胞生长

22、举例说明RNA结合蛋白对翻译过程的调节?

答:RNA结合蛋白(RBP,RNA birding protein)能与 RNA 特异序列结合,从而参与调节翻译过程。如铁反应元件结合蛋白(IRE-BP)(IRE: Iron response element,铁反应元件)与mRNA结合后,能促进ALA合成酶的合成等。

23、miRNA对基因表达有何影响?miRNA的特点有哪些?

答:miRNA(micro-RNA,微小RNA)属于小分子非编码 RNA,长度约20个碱基,它与一些蛋白质共同组成 RNA诱导沉默复合体 RISC(RNA-induced silencing complex),它能与mRNA结合,从而抑制 mRNA的翻译功能。

miRNA的特点:

(1) 长度为20-25个碱基。

(2) 在不同生物中普遍存在,昆虫、家鼠、人类乃至植物中均含有。

(3) 同一种类生物体内,其序列结构具有一定的保守性,但动植物之间其序列结构不存在一致性。

(4) miRNA 的表达具有明显时间特异性及空间特异性。

(5) miRNA基因以单拷贝、多拷贝或基因簇形式存在于非编码区,它具有高度多样性。

24、siRNA 对基因表达有何影响?什么是RNAi?

答:siRNA:干扰小RNA是由细胞内的一类双链RNA(dsRNA, double-stranded RNA),在特定条件下,由相应酶的酶切作用,产生了特殊序列的小片段dsRNA,长度约21-23碱基,称之为siRNA。这种双链 siRNA参与组成RISC,并能与特异的靶 mRNA互扑结合,导致mRNA降解,阻断翻译过程。这种由 siRNA介导的抑制基因表达的作用,称之为RNA干扰(RNAi,RNA inlerference), 它被广泛用于基因功能研究及基因治疗。

第二十章 常用分子生物学技术的原理及应用

1、什么是核酸分子杂交?

答:核酸分子杂交:根据核酸单链片段之间碱基互补而相结合的原理,用一已知碱基顺序的DNA或RNA单链片段作为探针来检测未知待测DNA或RNA中的核苷酸顺序。若对探针进行标记,根据有无标记信号而确定有无杂交体存在。又根据探针的碱基顺序,按碱基配对规则就可以测定待测DNA或RNA的碱基顺序。

2、什么是核酸探针?核酸探针的来源有哪些?探针的标记方法有哪些?

答:(1)核酸探针:核酸探针是一已知碱基顺序的DNA或 RNA单链片段,它能与待测 DNA或RNA 按碱基配对规则进行杂交反应。为了便于观察是否发生杂交反应以及杂交反应的位置及强弱,必须对探针进行标记,从而确定待测核酸(基因)是否存在,进而确定待测核酸的碱基顺序。

(2) 核酸探针的来源

① 人工合成:用核酸合成仪按预定目标合成一已知碱基顺序的寡核苷酸片段,常用的是DNA片段。

② 从基因组获得:用 PCR法扩增基因组中的某个基因片段。

③ cDNA探针:从真核细胞液中提取mRNA,经逆转录得到CDNA, 用cDNA全长或其部分片段作为探针。

④ RNA探针:由于RNA不太稳定,常较少用。

(3) 探针标记


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