临床生化标准操作程序文件(SOP)[1](5)

2025-04-28

7线性范围 0—450U/L 8 参考范围:0—40u/L

新生儿和婴儿的AST大约是成人的二倍,六个月以后降至成人水平。 9 失控控理

1:立即重测同一质控品,如重测后结果仍不再允许范围,请进行下一步。 2:新开一瓶质控品,重测失控项目,如新开的质控血清结果正常,那么原来质控血清可能过期或在室温防止时间过长而变质,如结果仍不再允许范围,则进行下一步。

3:进行仪器维护,重测失控项目。检查仪器状态,查明光源是否更换,比色杯是否需要清洗或更换?对仪器进行清洗等维护。另外还要检查试剂,此时可更换试剂已查明原因。如果结果仍不再允许范围内,则进行下一步。

4:重新校准。重测失控项目。用新的校准液校准仪器,排除校准液的原因。 5:请专家帮助。如果前五步都为能得到在控结果,那可能是仪器或试剂已查明原因,只有和仪器或试剂厂家联系请求他们的技术支援。 10 注意事项

1:试剂和样本用量可根据不同仪器要求按比例改变。

2:如测试结果超出线性范围,样本应稀释后测试,调整因子数或将结果乘以稀释倍数。

3:结果的准确性仪器校正和测定温度,时间的控制。

4:若试剂混浊,或以水为空白在405nm处吸光度值低于0.8时,则不能使用。 5:由医生根据临床症状和其他实验结果做出临床诊断 6:样本与废液等有潜在生物传染性危险,操作者颖遵守实验室安全操作规定并按当地医疗废弃物,感染性废弃物,产业废弃物等规定处理废液。 11:临床意义

1、急性病毒性肝炎是否转为慢性。急性肝炎常引起转氨酶(GPT、GOT)升高。随着病情好转,转氨酶逐渐恢复正常,如果γ-GT持续不降,多表示肝炎转为慢性。

2、慢性肝炎和肝硬化病人γ-GT持续升高表示病情不稳定或呈恶化倾向;若逐渐下降提示肝病转向不活动。

3、酒精性肝病转氨酶虽轻度上升,而γ-GT可中度升高。急性酒精肝病γ-GT升高达1000单位。经常饮酒者γ-GT常在80单位左右。

4、原发性肝癌胆内阻塞胆汁淤滞时,γ-GT多明显升高,数倍或数十倍于常量。 5、间断动态检测γ-GT,可查出肝外其他脏器肿瘤是否转移至肝脏。

6、阻塞性黄疸查γ-GT,常发现γ-GT升高程度与黄疸深度呈平行关系:黄疸越深,γ-GT越高。

碱性磷酸酶(ALP)测定(速率法)

标准化操作程序文件

单位:大同滨河肝胆病医院 科室: 检验科生化室 文件编号: 版本: 批准施日期: 有校期: 一年

复审计划:每年复审,测定系统变化时需进行修订 发放部门:检验科生化室 编写者: 审批者: 保管者: 修订者:

碱性磷酸酶(ALP)测定(速率法) 1:概述

碱性磷酸酶英文简称AKP或ALP,是广泛分布于人体各脏器器官中,其中以肝脏为最多其次为肾脏,骨骼、肠、和胎盘等组织,。它不是单一的酶,而是一组同功酶。目前已发现有 AKP1 、AKP2 、AKP3 、AKP4 、AKP5 与 AKP6 六种同功酶。碱性磷酸酶(ALP):是从牛肠粘膜或大肠杆菌中提取。从大肠杆菌提取的AP

分子量为80kD,酶作用的最适pH为8.0;用小牛肠黏膜提取的AP分子量为l00kD,最适pH为9.6.一般采用对硝基苯磷酸酯(p-NPP)作为底物。它可制成片状试剂,使用方便。产物为黄色的对硝基酚,在405nm有吸收峰。用NaOH终止酶反应后,黄色可稳定一段时间。 2标本的收集

新鲜无溶血标本,血清或血浆样本均不溶血。血浆样本只能采用肝素或EDTA抗凝。样本在4摄氏度可稳定7天。采血前病人应禁食12小时,采集静脉3ml,待凝固后(最好放在37摄氏度水浴箱内45分钟)通常为加抗凝剂的血液在30-60分钟凝血析出血清。3000r/min离心5-10分钟,分离出血清备用。不建议采用血浆标本。 3:方法原理

样本中的碱性磷酸酶催化水解磷酸对硝基苯酚,生成游离的对硝基苯酚和磷酸,

引起405nm处的光吸收值升高,,通过检测405nm处光吸收值上升的速率,可以测定碱性磷酸酶的活力。

4剂来源,配置及储存 试剂来源:迪瑞

试剂配置:试剂一和试剂二均为液体试剂,可直接使用。启用后在2-8度可稳定30天。若试剂混浊,或以蒸馏水为空白在405nm处的光吸收值低于0.8A,应予丢弃。 试剂储存:试剂避光储存2-8摄氏度可稳定至标签所示失效期。 5分析仪器

CS-600B全自动生化分析仪

分析参数:样品量4 u/l 试剂量:第一试剂200 u/l(R1);第二试剂50 u/l 测光点23—38 测定模式:速率法 正反应

分析波长:405nm/505nm(主波长/副波长)

6计算方法

ALP(U/L)=( A/min*Tv*1000)(18.8*Sv*P) 式中

Tv=总反应体积 Sv=样本体积

18.8=NADH在405nm处的毫摩尔消光系数 P=比色杯光径(cm)

7 线性范围:本实验的线性范围:0----850U/L 8 参考范围:男性:1---12岁 《500 U/L 12—15岁 《750 U/L 》25岁 40--150 U/L

女性:1---12岁 《500 U/L 》15岁 40--150 U/L

9 失控控理

1:立即重测同一质控品,如重测后结果仍不再允许范围,请进行下一步。

2:新开一瓶质控品,重测失控项目,如新开的质控血清结果正常,那么原来质控血清可能过期或在室温防止时间过长而变质,如结果仍不再允许范围,则进行下一步。

3:进行仪器维护,重测失控项目。检查仪器状态,查明光源是否更换,比色杯是否需要清洗或更换?对仪器进行清洗等维护。另外还要检查试剂,此时可更换试剂已查明原因。如果结果仍不再允许范围内,则进行下一步。

4:重新校准。重测失控项目。用新的校准液校准仪器,排除校准液的原因。

5:请专家帮助。如果前五步都为能得到在控结果,那可能是仪器或试剂已查明原因,只有和仪器或试剂厂家联系请求他们的技术支援。 10 注意事项

1:试剂和样本用量可根据不同仪器要求按比例改变。

2:如测试结果超出线性范围,样本应稀释后测试,调整因子数或将结果乘以稀释倍数。 3:结果的准确性仪器校正和测定温度,时间的控制。 4:由医生根据临床症状和其他实验结果做出临床诊断。 11:临床意义

临床上测定ALP主要用于骨骼、肝胆系统疾病的诊断和鉴别诊断,尤其是黄疸的鉴别诊断。对于不明原因的高ALP血清水平,可测定同工酶以协助明确其器官来源。

1.生理性增高:儿童在生理性的骨骼发育期,碱性磷酸酶活力可比正常人高1~2倍。处于生长期的青少年,以及孕妇和进食脂肪含量高的食物后均可以升高。

2.病理性升高: (1)骨骼疾病如佝偻病、软骨病、骨恶性肿瘤、恶性肿瘤骨转移等;

(2)肝胆疾病如肝外胆道阻塞、肝癌、肝硬化、毛细胆管性肝炎等; (3)其他疾病如甲状旁腺机能亢进。

3.病理性降低:见于重症慢性肾炎、儿童甲状腺机能不全、贫血等。

总胆红素(重氮盐法)

标准化操作程序文件

单位:大同滨河肝胆病医院 科室: 检验科生化室 文件编号: 版本: 批准施日期: 有校期: 一年

复审计划:每年复审,测定系统变化时需进行修订 发放部门:检验科生化室 编写者: 审批者: 保管者: 修订者


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