酸氨基转移酶(ALT)测定（速率丙氨法）
标准化操作程序文件
单位：大同滨河肝胆病医院 科室: 检验科生化室 文件编号： 版本： 批准施日期： 有校期: 一年
复审计划：每年复审，测定系统变化时需进行修订 发放部门：检验科生化室 编写者： 审批者: 保管者: 修订者：
丙氨酸氨基转移酶(ALT)测定（速率法） 1概述
肝脏内含有丰富的酶系统，以维持机体的正常生理代谢过程。不少酶是由肝脏合成并由肝胆系统排泄，当肝脏有病时，可由于酶生成亢进或释出异常，引起血清内酶的活性改变。这些改变在一定程度内反映了肝脏的功能状况。人体转氨酶的种类甚多，而以血清丙氨酸氨基转移酶，血清天门冬氨酸转换酶活性最强。此两种酶广泛在于机体组织细胞内，以肝脏，心脏，肾脏及骨骼肌中较多。在肝脏中丙氨酸氨基转移酶(ALT)的含量最多，AST以心肌含量最多，此两种转氨酶较多地释放在血液中，使血清中两种酶活性增高。 2 样本收集
新鲜无溶血标本，血清或血浆样本均不溶血。血浆样本只能采用肝素或EDTA抗凝。样本在4摄氏度可稳定7天。采血前病人应禁食12小时，采集静脉3ml,待凝固后（最好放在37摄氏度水浴箱内45分钟）通常为加抗凝剂的血液在30-60分钟凝血析出血清。3000r/min离心5-10分钟，分离出血清备用。不建议采用血浆标本。 3 方法原理
L-丙氨酸+α-酮戊二酸—————→丙酮酸+L-谷氨酸 丙酮酸+NADH—————→L-乳酸+NAD﹢ 4剂来源，配置及储存 试剂来源：迪瑞
试剂配置：试剂一和试剂二均为液体试剂，可直接使用。启用后在2-8度可稳定30天。若试剂混浊，或以蒸馏水为空白在340nm处的光吸收值低于1.0A,应予丢弃。
试剂储存：试剂避光储存2-8摄氏度可稳定至标签所示失效期。 5分析仪器
CS-600B全自动生化分析仪
分析参数：样品量15 u/l 试剂量：第一试剂240 u/l（R1）；第二试剂60 u/l 测光点23—38 测定模式：速率法 负反应 分析波长：340nm/405nm(主波长/副波长) 6计算方法
样本浓度（U/L）=样本管吸光度的变化×校准液浓度（U/L）
校正管吸光度的变化
7 线性范围：本实验的线性范围：4----1000U/L 8 参考范围：男性；：5—40U/L 女性：5---35 U/L 9 失控控理
1：立即重测同一质控品，如重测后结果仍不再允许范围，请进行下一步。 2：新开一瓶质控品，重测失控项目，如新开的质控血清结果正常，那么原来质控血清可能过期或在室温防止时间过长而变质，如结果仍不再允许范围，则进行下一步。
3：进行仪器维护，重测失控项目。检查仪器状态，查明光源是否更换，比色杯是否需要清洗或更换？对仪器进行清洗等维护。另外还要检查试剂，此时可更换试剂已查明原因。如果结果仍不再允许范围内，则进行下一步。
4：重新校准。重测失控项目。用新的校准液校准仪器，排除校准液的原因。 5：请专家帮助。如果前五步都为能得到在控结果，那可能是仪器或试剂已查明原因，只有和仪器或试剂厂家联系请求他们的技术支援。 10 注意事项
1:试剂和样本用量可根据不同仪器要求按比例改变。
2：如测试结果超出线性范围，样本应稀释后测试，调整因子数或将结果乘以稀释倍数。
3：结果的准确性仪器校正和测定温度，时间的控制。
4：高血脂或黄疸样本在340nm处有较高的吸光度值。这类样本的高值ALT耗尽底物后，在340nm处仍维持较高的吸光度值，此时样本应稀释后在进行测定。 5：由医生根据临床症状和其他实验结果做出临床诊断。 11 临床意义 ALT活性高
1) 肝胆疾病 传染性肝炎、中毒性肝炎、脂肪肝和胆管炎等。
2) 心血管疾病 心肌梗死、心肌炎、心力衰竭时肝淤血和脑出血等。 3) 药物和毒物 氯丙嗪，异 肼、奎宁、水杨酸制剂及乙醇，铅、 ALT活性降低 磷酸吡多醛缺乏症。
Y-谷氨酰转移酶（速率法）
标准化操作程序文件
单位：大同滨河肝胆病医院 科室: 检验科生化室 文件编号： 版本： 批准施日期： 有校期: 一年
复审计划：每年复审，测定系统变化时需进行修订 发放部门：检验科生化室 编写者： 审批者: 保管者: 修订者：
Y-谷氨酰转移酶（速率法） 1：概述
健康人血清γ－GT水平甚低（＜40单位），主要来自肝脏，少许由肾、胰、小肠产生。
γ－GT在反映肝细胞坏死损害方面不及ALT，但在黄疸鉴别方面有一定意义，肝脏内排泄不畅（肝内梗阻）和肝外梗阻（如胆道系统阻塞）以及肝硬化、肝肿瘤中毒性肝病、酒精性肝病、脂肪肝等均可升高。?
γ－谷氨酰转移酶（γ－GT）在人体细胞的微粒体中合成。某些药物和酒精可使其合成增加。它的主要功能是参与体内蛋白质代谢，且广泛存在于人体各组织及器官中，以肾脏最为丰富，其次是胰肝等处。在肝脏主要存在于肝细胞浆和胆管上皮细胞中。正常成年人血清中γ－GT活性很低，主要来源于肝脏。。 2 样本收集
新鲜无溶血标本，血清或血浆样本均不溶血。血浆样本只能采用肝素或EDTA抗凝。样本在4摄氏度可稳定7天。采血前病人应禁食12小时，采集静脉3ml,待凝固后（最好放在37摄氏度水浴箱内45分钟）通常为加抗凝剂的血液在30-60分钟凝血析出血清。3000r/min离心5-10分钟，分离出血清备用。不建议采用血浆标本。 3 方法原理
试剂中L-γ-谷氨酰-3羟基-4硝基苯胺和甘氨酸在样品中γ－谷氨酰转移酶的催化作用下，生成色产物5-氨基-2硝基苯甲酸盐，引起405nm处的吸光值升高，通过监测405nm处光吸收值上升的速率，可以测定γ－谷氨酰转移酶的活力。
4剂来源，配置及储存 试剂来源：迪瑞
试剂配置：试剂一和试剂二均为液体试剂，可直接使用。启用后在2-8度可稳定30天。若试剂混浊，或以蒸馏水为空白在405nm处的光吸收值低于0.8A,应予丢弃。
试剂储存：试剂避光储存2-8摄氏度可稳定至标签所示失效期。 5分析仪器
CS-600B全自动生化分析仪
分析参数：样品量50 u/l 试剂量：第一试剂200 u/l（R1）；第二试剂50 u/l 测光点23—38 测定模式：速率法 正反应 分析波长：405nm/505nm(主波长/副波长)
6计算方法
γ－GT (U/L)=( A/min*Tv*1000)(9.5*Sv*P) 式中
Tv=总反应体积 Sv=样本体积
9.5=NADH在340nm处的毫摩尔消光系数 P=比色杯光径（cm）
