作者：王祥培，吴红梅，陈国仁，许士娜
【摘要】 目的为准确鉴别威灵仙和柱果铁线莲种子提供依据。方法采用扫描电镜法对威灵仙及柱果铁线莲的种子表面特征进行比较观察。结果威灵仙及柱果铁线莲种子之间在表面结构特征上具有一定的差别。结论威灵仙及柱果铁线莲种子的表面特征差异可以作为二者的鉴别依据。
【关键词】 威灵仙 ； 柱果铁线莲 ； 种子； 扫描电镜
威灵仙为毛茛科铁线莲属植物威灵仙Clematis chinesis Osbeck，棉团铁线莲 Clematis hexapetala Pall ,东北铁线莲 Clematis manshurica Rupr.的干燥根及根茎。具有祛风除湿、通络止痛之功效，主要用于治疗风湿痹痛，肢体麻木，筋脉拘挛，屈伸不利，骨哽咽喉等症状［1］。文献报道［2］，柱果铁线莲Clematis uncinata Champ.的根及根茎作威灵仙药材销往南方各省。同时，柱果铁线莲也是贵州省作威灵仙用的主流品种［3，4］。目前关于威灵仙与柱果铁线莲药材的紫外鉴别、主要药效学及体内外化学成分的比较已有研究报道［5～7］,但威灵仙及柱果铁线莲种子的比较研究未见报道。由于威灵仙及柱果铁线莲药材均多以种子繁殖，且是同科同属的植物，其种子在外形上相似，易于混淆。为了进一步明确威灵仙及柱果铁线莲种子间的差异，现对威灵仙及柱果铁线莲的种子表面特征进行观察，以期为威灵仙的种子分类鉴别及引种栽培提供科学依据。
1 材料与仪器
1.1 材料威灵仙种子采集于成都中医药大学药用植物园，经原植物鉴定为威灵仙Clematis chinesis Osbeck；柱果铁线莲种子采集于贵阳黔灵山，经原植物鉴定为柱果铁线莲Clematis uacinata Champ。
1.2 仪器日立公司S-3000N型扫描电镜。
2 方法
将样品种子在超声装置上超声清洗2 min，除去种子表面的杂质和灰尘，再分别以50%，70%，80%，90%，100%浓度乙醇梯度脱水，自然干燥后用导电双面胶布将样品固定在样品台上。真空喷金镀膜90 s。取出将样品放入S-3000N型扫描电镜观察室，以15 kV加速电压进行观察。结果见图1～15。
3 结果
3.1 威灵仙种子和柱果铁线莲种子的整体表面观
3.1.1 威灵仙种子的整体表面观为扁卵圆形，表面黑灰色。长3.7～5 cm，宽2.9～4.1 cm,厚约0.9 mm。种子两面中间各具一圆卵形微凹。边缘较宽而厚，基部稍尖；种脐在尖头上凹陷，圆形，小。花柱和种子表面可见密布的毛，黄白色，羽状。顶端有羽状花柱残留，花柱长1.5～4.0 cm，花柱毛直径10～12.5 μm，黄白色羽毛长约3.0 mm（见图1～3）。
3.1.2 柱果铁线莲种子的整体表面观为圆柱近钻形，表面棕褐色。长0.6～0.7 cm,底部直径约1.0 mm，中部直径约0.8 mm。顶部直径约0.4 mm。皱缩，有纵皱纹。基部钝平,稍突,种脐在突起上微凹。种子表面无毛，或顶端有稀疏毛。顶端有羽状花柱残留，花柱长0.9～1.9 cm，花柱毛直径10～30 μm，黄白色羽毛长3～4 mm（见图4～5）。
3.2 威灵仙种子和柱果铁线莲种子表面超微结构
3.2.1 威灵仙种子的表面超微结构100×时可见侧面皱缩而成的横皱纹（见图2），200×时在毛根部之间见到紧密的纵皱纹连接（见图6）。在100×时可见到底部的种脐有果柄残留，并向内凹陷呈圆柱空心状（见图7）。在300×和600×时可见到鱼鳞状突起的纹饰（见图8，图9）。在1 000×时可看到毛根处的紧密皱纹（见图10）。
3.2.2 柱果铁线莲种子的表面超微结构
100×时可见整体是密集的纵皱纹，由上而下由密变疏 ，上部密而窄，下部疏而宽（见图11～13）。300×时可看到柱果铁线莲种子在接近底部时皱缩形成纵沟和脊（见图14），在脊上可见少量向下凹陷的小坑（见图14）。在300×时底部则向内凹陷形成圆形种脐（见图15）。
