农药混剂联合毒性评价

关键字：  农药混剂 
　　1　材料和方法
　　1.1　实验材料和配制
　　1.1.1　试剂品级和来源　试验农药均为工业品级原药。76.5%甲基对硫磷、80%丙溴磷、88%氧乐果、85%敌敌畏由天津农药总厂提供；85%水胺硫磷、90%马拉硫磷、90%甲氰菊酯、84.5%氰戊菊酯、94%高效氯氰菊酯、97%灭多威由北京华戎生物激素厂提供；99%溴氰菊酯由天津艾格福(Agrevo)公司提供；95%速灭威、98%异丙威由上海东风农药厂提供；98%辛硫磷由北京东方农药厂提供；90%甲胺磷由石家庄农药厂提供；吐温80由广州南方化玻公司进口分装；花生油为市售商品。
　　1.1.2　配制　除水溶性农药用蒸馏水配制外，其它农药均加入适量吐温80作为助溶剂，搅拌混匀使与农药充分接触，再加入蒸馏水配制成混悬液备用。
　　1.2　试验动物
　　Wistar大鼠，清洁级，体重180～220g。由中国医学科学院实验动物研究所繁育场提供。将受试动物按体重随机分组，每组10只，雌雄各半。
　　1.3　染毒剂量和方法
　　1.3.1　染毒剂量　根据统计计算毒性参数的方法，每一项LD50按等比梯度设定5～8剂量组。
　　1.3.2　染毒方法　动物禁食12h后，单剂一次经口染毒，混剂按等毒所需剂量分别灌胃给药，2次给药间隔8秒，根据“农药登记毒理学试验方法”对染毒大鼠连续观察2周，记录动物症状发生时间、中毒表现、死亡时间和死亡数。
　　1.4　资料的统计分析
　　1.4.1　LD50的计算　依照Bliss法　计算单剂和混剂的LD50及95%可信限，并获得相应的对数剂量-效应回归方程。
　　1.4.2　联合作用方式的判断　采用Harris法［2］，根据各单剂的LD50及95%可信限计算混配农药的预期LD50及95%可信限，再计算预期LD50与观察LD50的比值，称毒性比(TR)。TR等于1且预期与观察LD50的95%可信限互相覆盖，为相加作用；TR＞1，预期与观察LD50的95%可信限不互相覆盖，为协同作用；TR＜1，预期与观察LD50的95%可信限不互相覆盖，为拮抗作用。
　　2　结果
　　2.1　中毒症状
　　2.1.1　有机磷与有机磷混配　大鼠经口灌服有机磷农药各种单剂后在出现症状的潜伏期、高峰期、死亡、恢复等过程基本相似，不同农药之间只是症状的出现和维持时间及程度上差异，均相继出现流涎、肌束震颤、全身震颤、抽搐、惊厥、出汗、呼吸抑制、紫绀、死亡等典型的胆碱能危象的表现。2种有机磷混配给药与单剂的上述过程相似，在症状的出现时间、持续时间和程度上有差异。需要特别指出的是氧乐果和辛硫磷，混配染毒后约1h出现肌无力、四肢瘫软，可持续2～3天。
　　2.1.2　有机磷与拟除虫菊酯类混配　动物染毒后一般首先出现胆碱能症状，如流涎、震颤、抽搐等，继而出现Ⅱ型拟除虫菊酯类症状(CS症候群)，其中包括震颤、流涎、步态不稳、肌紧张、舞蹈样扭动、惊厥，并可致死亡。幸存的动物上述症状仍可持续数日。值得指出的是辛硫磷与氰戊菊酯混配给药后出现四肢无力，持续2日后两后肢瘫痪，但可在4日内恢复，提示有一过性肌无力发生，两单剂均未出现上述症状。
　　2.1.3　有机磷与氨基甲酸酯类农药混配　与大鼠经口灌服有机磷农药后出现的症状基本相似，但潜伏期、高峰期、死亡、恢复期均明显缩短。
　　总之，混配农药中毒的症状潜伏期短、死亡较快，但症状持续时间较单剂相对为长。各组死亡动物大体解剖肉眼观察未见明显病变。

　　3　讨论
　　本研究对国内常用的8种有机磷、4种拟除虫菊酯、3种氨基甲酸酯类农药组成的13对等毒剂量混剂的联合急性毒性作用进行了评价。按Harris法评价的结果表明：在有机磷混剂中辛硫磷+甲基对硫磷呈拮抗作用，甲胺磷+丙溴磷、敌敌畏+氧乐果混配为相加作用；在有机磷与拟除虫菊酯类混配后，除敌敌畏+溴氰菊酯和辛硫磷+氰戊菊酯为相加作用外，其它4对混配均为协同作用；在有机磷和氨基甲酸酯的混剂中，甲基对硫磷+灭多威为拮抗作用，辛硫磷+灭多威、甲胺磷+速灭威为相加作用，马拉硫磷+异丙威为协同作用。