【摘要】 [目的]测定肉豆蔻中肉豆蔻醚在沸水后下煎药法中煎出量及变化。[方法]采用RPHPLC法,TigerkinC18柱(150mm×4.6mm,5μm)，以甲醇∶0.025mol/L磷酸(70∶30)为流动相，流速1.0ml·min-1，波长282nm，柱温25℃。[结果]肉豆蔻醚在0.4μg～2.0μg范围内与峰面积线性关系良好r=0.9998。[结论]肉豆蔻在沸水后下煎药法中，其肉豆蔻醚在汤药中的含量在2.45min达到高峰，其后汤药中肉豆蔻醚的含量逐渐降低。
【关键词】 肉豆蔻;肉豆蔻醚;反相高效液相色谱法
Abstract: [Objective]To measure the contents of Nutmeg ether,and its regularity varying with decoction time .[Method]RPHPLC method was used.The chromatographic conditions were listed below TigerkinC18 column (150mm×4.6mm.5μm),amobine phase composed of metranol-0.025mol/L phosphoric acid (70∶30),a flow rate of 1mL ·min-1 and wave lengths was 282nm,column temperature was 25 ℃.[Results]In the range of 0.4μg ～2.0μg,the linear was very well between the content of Nutmeg ether and peak area.[Conclusion] The contents of Nutmeg ether in decoction reached the peak at 2.45min after Nutmeg ether was added in boiling water .
Key words: Nutmeg; Nutmeg ether; RPHPLC
肉豆蔻，为肉豆寇科植物肉豆寇myristica fragrans Houtt的成熟种仁[24]。肉豆蔻醚是肉豆蔻主要有效成分之一，有关它的检测方法国内已有许多报道[5]，本文用RPHPLC法测定在不同时间段肉豆蔻醚在汤药中的含量及变化规律，以确定相关中药汤剂中肉豆蔻后下的最佳煎煮时间,由拟和曲线法算得肉豆蔻醚在2.45min时含量最高，其后汤药中的肉豆蔻醚含量逐渐下降，其方法简便、准确、可靠。
1 仪器与试药
美国Waters高效液相色谱仪，484紫外检测，510泵，浙江大学N2000色谱工作台，甲醇为色谱醇，水为双蒸水。肉豆蔻醚化学对照品(中国药品生物制品检定所1363700 30808312)，肉豆蔻药材(浙江中医学院中药饮片厂批号080925)。
2 色谱条件
色谱柱：TigerkinC18柱(150mm×4.6mm,5um)，流动相：甲醇0.025mol/L磷酸(70∶30)，流速：1.0ml/min，检验波长：282nm，柱温25℃。
3 方法与结果
3.1 对照品溶液制备 精密称取肉豆蔻醚对照品4mg，置于10 ml量瓶中，用甲醇稀释至刻度，得对照品储备液。将对照品储备液按不同比例稀释，分别得质量浓度为400μg/ml，320μg/ml，240μg/ml，160μg·ml，80μg/ml的溶液，待用。
3.2 样品溶液的制备 取烧杯1个，加水400ml，调节电压慢火至沸，放入肉豆蔻药材80g开始计时，后用文火煎煮，1～4min内每隔30秒取1次样(每次1ml),后在第5、6、8、9、10、13、14、16、17min各取1次样，最终提取18种待测样品经离心，取上清液，再经微孔滤膜过滤后待测。
3.3 线性范围 精密吸取上述各种对照品溶液各5μl，进样,记录色谱图(见图1)，以对照品峰面积Y为纵坐标，进样量X(μg)为横坐标绘制标准曲线，肉豆蔻醚浓度在0.4～2.0μg范围内与峰面积呈良好的线性关系。回归方程：
y=280910x-125990r=0.9998(n=5)
3.4 精密度，稳定性和重复性 精密吸取肉豆蔻醚对照品溶液20μl，连续进样6次，测定峰面积，计算得RSD为1.48%;分别精密吸取同一样品样品溶液5μl，于0，1，2，4，8h后进样，测定肉豆蔻醚峰面积积分分值，RSD为3.14%，稳定性良好;称取同一批号肉豆蔻药材80g6份，在同一温度、加水量及煎药法下，取样处理后，测定肉豆蔻醚峰面积积分值，RSD为3.74%,重复性良好。
