2.5 统计学处理
采用SPSS 15.0进行数据处理。
3 结果
3.1 秦艽总苷对SMMC-7721细胞增殖的影响
结果见表1。由表1可见，秦艽总苷浓度为31.25，62.5 μg/ml时无抑制作用，而在125， 250， 500，1 000 μg/ml时有一定的抑制作用，其抑制率随浓度和时间而呈上升趋势（P<0.05），与同浓度的龙胆苦苷相比秦艽总苷抑制率较大。
表1 秦艽总苷对SMMC-7721细胞增殖的影响（略）
3.2 不同浓度秦艽总苷对细胞凋亡的影响
结果见表2及图1～2。随着秦艽总苷浓度的增加，早期凋亡期细胞比率增加。表2 不同浓度秦艽总苷对细胞凋亡的影响（略）
3.3 细胞形态学观察
瑞-姬氏染色显示，阴性对照组SMMC-7721细胞增殖活跃，分裂期细胞多见，细胞核呈类圆形，边界清，染色质均匀分布呈浅蓝色，核仁明显（2～3）个，细胞有伪足使细胞形态不规则，细胞密度高（见图3）。秦艽总苷作用后48h后，SMMC-7721细胞形态发生明显变化，细胞密度降低并出现凋亡细胞，细胞体积变小，细胞核固缩，核仁消失，核染色呈紫蓝色。见图4。
4 讨论
肿瘤是严重威胁人类健康的一类常见疾病，多发病。临床治疗肿瘤西医一般采用手术、放疗、化疗三大疗法，疗效快捷，确有根治效果，但往往有明显的损伤和毒副作用。因此，寻找有效且无损伤和毒副作用的抗癌药物与方法，彻底攻克癌症，是世界医学界重要的研究课题。通过长期的研究和探索，中医药治疗肿瘤已取得了很大进展，而且中药材自然资源丰富、品种繁多、毒副作用低、价格低廉、为抗肿瘤较为理想的药物。许多国内外学者从天然药物筛选到有效单体提取做了大量研究，显示了中医药治疗肿瘤的独特优势。中医学认为,热毒是肿瘤发生、发展的一个重要因素。实验研究提示清热解毒中药通过抑制细胞增殖、诱导凋亡、分化及逆转、调节机体免疫水平、调控细胞信号通路及传导、抗突变、抑制血管生成和抗多药耐药等多种途径发挥抗肿瘤作用［10］。
细胞增殖过盛和凋亡抑制被认为是肿瘤发生发展的关键，多种化疗药物均可引起细胞的凋亡［11］。本实验流式细胞仪检测显示，一定浓度的秦艽总苷和龙胆苦苷作用后，凋亡前期细胞率都明显增高，并显示出在同浓度下秦艽总苷处理组抑制率大于龙胆苦苷处理组；发现秦艽总苷作用于SMMC-7721细胞后光镜下可观察到凋亡细胞形态学变化，证明秦艽总苷对人肝癌SMMC-7721细胞抑制作用的机理与诱导癌细胞凋亡有关。
本研究观察秦艽总苷在体外对人肝癌SMMC-7721细胞增殖的影响，结果显示当秦艽总苷浓度为125 μg/ml时即有抑制作用,随着秦艽总苷浓度的增加和时间的延长其抑制作用更加明显，表明秦艽总苷对SMMC-7721细胞生长的作用与药物浓度和时间有密切关系；与同浓度的龙胆苦苷相比较，秦艽总苷抑制率较大，表明秦艽总苷对SMMC-7721细胞的抑制作用比单体龙胆苦苷更强。
现代药理学研究证明，秦艽的主要成分龙胆苦苷（GPS）能抑制多种炎症介质包括组胺、5-HT、LTB4、IL-1、TNF-α、PG、血栓素血小板活性因子、氧自由基等的释放，对人肝癌细胞具有杀伤效应［12］。然而，氧自由基在细胞增殖、分化、逆转过程中起着重要作用。因此，GPS及秦艽总苷抑制肝癌细胞的机理有待进一步深入研究。
【参考文献】
1］国家药典委员会.中国药典，Ⅰ部［S］.北京：化学工业出版社，2005:190.
［2］黄泰康,丁志遵,赵守训,等.现代本草纲目［M］.北京:中国医药科技出版社,2001:2091.
［3］芦启琴,娄灯吉,沈建伟,等.秦艽化学成分及药理作用研究进展［J］.安徽农业科学,2007, 35(29):9299.
