2.4 绿原酸含量的测定用分光光度法[10]进行测定。所得标准曲线的回归方程是：Y= 0.128 3 + 0.022 7X，r2 = 0.996 7
2.5 总黄酮含量的测定用芦丁做标准，分光光度法测定[11]。所得标准曲线的回归方程是：Y= 0.001 2 + 0.035 8X，r2= 0.999 9
3 结果与分析
3.1 金银花水提液对H2O2的作用所有能产生O2-·的生物体系都能通过歧化反应产生H2O2。H2O2能使少数酶的-SH基氧化失活，能迅速穿过细胞膜;在有过渡金属离子(如Fe2+或Cu+)存在时，发生典型的Fenton反应，生成·OH[12]。·OH是化学性质最活泼、毒性最大的活性氧[13]。在反应体系中对H2O2具有清除作用，就可能抑制H2O2对机体的不利影响。在取样量为10 ml时，超声波处理的和直接水煮的金银花水提液对H2O2清除作用的实验结果见表1。
由表1可知，超声波处理的和直接水煮的金银花水提液对H2O2的清除作用随浓度的增加而增加，但增加的幅度较小且清除能力非常弱 表1 金银花提取液对H2O2的作用
3.2 金银花水提液对·OH的作用·OH是毒性最大的活性氧，对细胞内DNA的破坏作用最大[14]，它可以形成碱基自由基。生成的这些嘧啶和嘌呤自由基可以相互结合，或再通过其它自由基反应生成过氧化物，这些变化可造成碱基的破坏，从而产生遗传突变。在取样量为1.0ml时，超声波处理的和直接水煮的金银花水提液对·OH作用的实验结果见表2。表2 金银花提取液对·OH的清除率%
由表2可知，超声波处理的金银花水提液对·OH的清除作用是随浓度的增加而增强，当加入1∶20的提取液1.0 ml，对实验体系中·OH的清除率可达100%。而水煮得的金银花水提液当浓度低于20 mg/ml(1∶50)时，随浓度的增加对·OH的清除作用增强，然而当浓度再增加，它们对·OH的清除作用反而减弱，当提取液的浓度达到50 mg/ml(1∶20)其清除率为0。本实验分析了这两种提取液中绿原酸和总黄酮的含量，结果见表3。由表3可知，两种提取液中绿原酸的含量无明显差别，但总黄酮的含量差别较大，超声波处理的金银花水提液中总黄酮的含量较高。是它们之间黄酮含量的差别导致对·OH的清除作用的差异还是其它成分在起作用有待进一步研究。
表3 金银花提取液中绿原酸和总黄酮的含量μg·ml-1以直接水煮得到的金银花水提液中对·OH的清除作用最强的1∶50的提取液为研究对象，考察不同的加入量对·OH的清除作用，实验结果见图1。图1 1∶50的金银花水提液对·OH的清除作用由实验结果可知，当加入量不超过0.7ml时，该提取液对·OH的清除率随加入量的增加呈线性上升，达到78.26%后，随提取液加入量的增加，清除率的增加就非常缓慢。
3.3 金银花水提液对O2-·的作用 以1∶5(0.2g干花/ml)的金银花液为样本，研究不同加样量超声波处理的和直接水煮的金银花水提液对O2-·的作用，实验结果见图2。图2 不同量金银花提取液对O2-·的清除作用
由图2可知，超声波处理的和直接水煮的金银花水提液对O2-·都具有较强的清除作用，且作用的趋势和能力一致。当它们的加入量不超过250μl时，对O2-·的清除率随加入量的增加呈线性上升;以后随加入量的增加，其清除率基本不增加。
本文研究的金银花的两种提取液除对H2O2的清除作用较弱外，对·OH、O2-·都具有较强的清除作用，因而金银花值得作为抗氧化剂进一步开发。
【参考文献】
[1] Nedyalka V. Yanishlieva, Emma Marinova, et al. Natural antioxidants from herbs and spices[J].European Journal of Lipid Science and Technology,2006,108 (9):776.
[2] S.Y.Kim, J.H.Kim, S.K.Kim，et al. Antioxidant activities of selected oriental herb extracts[J]. Journal of the American Oil Chemists' Society,1994,71(6): 633.
