建立反应体系:蒸馏水9 μl 前引物0.5 μl,后引物0.5 μl HotStar Taq Master Mix 12.5 μl(包含4种dNTP,Mg2+,Taq DNA聚合酶, 以及Tris·Cl-KCl缓冲液) DNA 模板2.5 μl
PCR反应条件:CYP2C19*2:94℃预变性15min→94℃变性40s→51℃退火30s→72℃延伸30s 循环35次,最后72℃延伸10min。产物长度458bp CYP2C19*3:94℃预变性15min→94℃变性30s→56℃退火30s→72℃延伸30s 循环35次,最后72℃延伸10min。产物长度233bp。
PCR产物电泳检测 紫外灯下判读结果,目的条带清晰且无非特异扩增者进行下一步实验 照相存档