足。HeuerDN等[14]采用MS-LC-MS方法鉴定了鸡蛋中16种磺胺类药物及其残留量,最低定量限为5.0~
高特异性ELISA法,可同时测定磺胺噻唑(ST)等6种磺胺类药物,检测限1.5~4.5ng/mL,回收率106%。
10.0ng,回收率>55.00%。随着样品处理方法的自动化,
在线净化方法也应用到质谱分析中,Thompson等[15]建立了检测蜂蜜中7种磺胺类药物的简单快速液质联用技术,回收率为93.30%~101.90%,最低检测限为0.5~2.0
4.3免疫层析法(金标试纸条)胶体金免疫层析试纸
条检测速度快,灵敏度高,整个样品分析时间约5~10
min。Verheijen等[22]制得了SM2胶体金快速检测试纸条,
此试纸条检测SM2标准液和牛尿样本,检测限10.0ng/
ng/g。此方法采用在线提取净化适合于大量样品的检
测。
mL,稀释后的新鲜牛奶检测限20.0ng/mL。
5
生物传感器法
生物传感器是以固定化的生物成分(如酶、蛋白质、
讨论与展望
磺胺类药物残留的以上几种检测方法各有优缺点,
3
微生物法操作简单,适合抗生素总残留的检测,不适合单个药物残留的检测,并且检测限高。
理化法检测结果准确,分辨率高,可以做单个药物的残留检测,但是理化设备往往价格昂贵,成本高,并且需要专门的技术人员,不适合现场快速检测。
免疫法目前越来越受到重视,因其检测限低,单个样品检测成本低(如ELISA法),并且适合现场快速检测,尤其是免疫层析法,检测速度快,灵敏度高,样品分析时间短,而且成本低,无需大型仪器,人员要求低,适用于现场检测。
兽药残留问题是关乎人民群众生命安全的大问题,仅仅通过提高检测技术是不够的,需要提高广大群众的认识,增强法制观念,提高养殖户的素质,同时加快立法速度,严惩兽药残留超标企业,切实提高我国动物源性食品安全水平。
参考文献
[1]
LittefieldNA,GaylorDW,BlackwellBN,etal.Chionictoxicity∥CarcinogenicitystudiesofsulphamethazineinB6C3FAmice.FoodChem.Toxicol1989,27(7):455-63[2][3]
SternesjoA.Mellgren,CandBjorck,L.Anmialbiochem.1995(226):175-181
廖理克,屈裕华,吴孔兴.几种兽药残留对人体的危害.广东畜牧兽医科技,2004,29(2):66
DNA、抗体、抗原)或生物体本身(如细胞、微生物、组织
等)为敏感材料,与适当的化学换能器相结合,用于快速检测物理、化学、生物量的新型器件,与其他方法相比具有精度高,可以做到小型化、自动化、方便现场检测。
Gaudin等[16]建立了测定牛奶中SM2残留的生物传感器
方法,将SM2与经改良的甲基葡聚糖表面共价连接,其多克隆抗体以不同流速经过,检测限可达17.0ng/g。
Haasnoot等[17]建立了单克隆抗体(21C7)为基础的检测
鸡血浆中8种磺胺类药物的生物传感器免疫方法,血浆稀释10倍的情况下最低检测限7.0~20.0ng/mL。
4免疫法
免疫法主要有放射性免疫法、酶联免疫吸附法、生
物传感器法、胶体金免疫层析法等。
4.1放射性免疫法(RIA)放射性免疫法是最早建立
的经典的免疫分析方法,此法样品前处理提取方法简便,可以检测磺胺类总残留量,已经为欧盟和美国FDA认可并且应用于初筛分析[18]。但RIA有缺陷:1)放射性核素半衰期短;2)反应时间过长(数h~过夜)不利于临床应用;3)分析的灵敏度是10~7g/mL或10~12g/
mL,再提高有困难,并难以自动化分析,制约了它的发
展。
4.2酶联免疫吸附法(ELISA)酶联免疫吸附法
[4]
(ELISA)具有灵敏度高、特异性强、操作简便、快速、可用
于大批量样品检测的特点,已成为对磺胺类药物残留大批样本进行定性、定量测定的方法。由于磺胺类药物本身并不具有免疫原性,所以通常将其与载体蛋白进行偶联。Haasnoot[19-20]用合成的母核衍生物TS、PS结合物免疫动物获得了4株单克隆抗体,单抗27G3对18种在<
BarhamR,BlackWD,ClaxtonJ,etal.RapidAssayforDetectingSulfonamidesinTissuesofSlaughteredAnimals.JFoodProtection,2001,64(10):1565-1573
[5]AndrewCannavanetal.GasChromatographic-MassSpectrometricDeterminationofSulfamethazineinAnimalTissuesUsingaMethylTrimethysilyDerivative.J.TheAnalyst,1996,121(10):1457-1461
10.000μg/mL的浓度呈现50%抑制(I50)。其中的8种SAsI50<0.1000μg/mL。对于磺胺喹噁啉(SQX),SM2磺
胺氯吡嗪(SPZ)检出限较高。NuriapastorN等建立了
[21]
[6]GerryJ.ReimenandAagripinaSuarel.Developmentofascreeningmethodforfivesulfonamidesinsalmonmuscletissueusingthin-layerchromatography.J.Chromatography,1991(555):315,320
[7]StoevG,MichailovaA.QuantitativeDeterminationofSulfonamide
北京农业2009年8月下旬刊
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