?受体减量调节与内吞后受体的分选有关。
磷脂酰肌醇信号通路
? “双信使系统”反应链：胞外信号分子→G-蛋白偶联受体→G-蛋白→ →IP3→胞内Ca2+浓度升高→Ca2+结合蛋白(CaM)→细胞反应
磷脂酶C(PLC)→
→DG→激活PKC→蛋白磷酸化或促Na+/H+交换使胞内pH?
受体酪氨酸激酶及RTK-Ras蛋白信号通路
?受体酪氨酸激酶（receptor tyrosine kinases，RTKs） 包括6个亚族
?信号转导：配体→受体→受体二聚化→受体的自磷酸化→ 激活RTK→胞内信号蛋白→启动信号传导 ? RTK- Ras信号通路：
配体→RTK→ adaptor ←GRF→Ras→Raf（MAPKKK）→MAPKK→MAPK→进入细胞核→其它激酶或基因调控蛋白
（转录因子）的磷酸化修钸。
?G蛋白偶联受体介导的MAPK的激活
? RTKs的失敏（desensitization）
G蛋白偶联受体介导的MAPK的激活
?MAPK（Mitogen-activated protein kinase）又称ERK（extracelular signal-regulated kinase）----真核细胞广泛存在的Ser/Thr蛋白激酶。 ? MAPK的底物：膜蛋白（受体、酶）、胞浆蛋白、核骨架蛋白、及多种核内或胞浆内的转录调控因子----在细胞增殖和分化中具有重要调控作用。
? PTX敏感性G蛋白（Gi，Go）的??亚基依赖于Ras激活MAPK，具体
机制还有待深入研究；
? PKC、PLC与G蛋白偶联受体介导的MAPK激活
PKC和PLC 参与G蛋白偶联受体激活MAPK ：
? G蛋白偶联受体激活G蛋白； G蛋白?亚基或?? 亚基激活PLC，促进膜磷脂代谢； 磷脂代谢产物（ DAG + IP3 ）激活PKC； PKC 通过Ras 或 Raf 激活MAPK ；
?由于PKC对钙的依赖性不同，所以G蛋白偶联受体– MAPK途径对钙要 求不同；
? PKA对G蛋白偶联受体– MAPK途径的负调控
?迄今未发现和制备出MAPK组成型突变（dominant negative
mutant），提示细胞难于忍受MAPK的持续激活（MAPK的去活是细胞维持正常生长代谢所必须）。主要机制：特异性的Tyr/Thr磷脂酶可选择性地使MAPK去磷酸化，关闭MAPK信号。
? cAMP ?， MAPK ?；cAMP直接激活cAMP依赖的PKA；PKA可能通过RTK或通过抑制Raf-Ras相互作用起负调控作用。
RTKs的失敏：
催化性受体的效应器位于受体本身，因此失敏即酶活性速发抑制。
?机制：受体的磷酸化修饰。EGF受体Thr654的磷酸化导致RTK活性的 抑制，如果该位点产生Ala突变，则阻止活性抑制，后又发现C
端的Ser1046/7也是磷酸化位点。磷酸化位点所在的C端恰好是 SH2蛋白的结合部位。
?引起受体磷酸化的激酶：
PKC----作用于Thr654；
CaMK2（Ca2+和CaM依赖的激酶2）----作用于Ser1046/7 ?还发现：EGF受体是CDK的靶蛋白，提示和周期调控有关。
? RTK晶体结构研究表明， RTK激活后形成稳定的非抑制性构象；磷
酸化修饰后，形成抑制性构象，引起失敏。
? RTK失敏对细胞正常功能所必须， RTK 的持续激活将导致细胞生长失控。
由细胞表面整合蛋白介导的信号传递
??整合蛋白与粘着斑 ??导致粘着斑装配的信号通路有两条 ??粘着斑的功能：
?一是机械结构功能； ?二是信号传递功能 ??通过粘着斑由整合蛋白介导的信号传递通路：
?由细胞表面到细胞核的信号通路
?由细胞表面到细胞质核糖体的信号通路
细胞信号传递的基本特征 与蛋白激酶的网络整合信息
●细胞信号传递的基本特征：
?具有收敛（convergence）或发散（divergence）的特点 ?细胞的信号传导既具有专一性又有作用机制的相似性 ?信号的放大作用和信号所启动的作用的终止并存
?细胞以不同的方式产生对信号的适应(失敏与减量调节) ●蛋白激酶的网络整合信息与信号网络系统中的cross talk
第六章 细胞质基质与细胞内膜系统
第一节 细胞质基质
?细胞质基质 （cytoplasmic matrix or cytomatrix）
?细胞内膜系统（endomembrane system）
第二节 内 质 网
? 内质网(endoplasmic reticulum,ER) ? 的形态结构
? ER的功能
?内质网与基因表达的调控
第三节 高尔基体
? 高尔基体的形态结构
? 高尔基体的功能
? 高尔基体与细胞内的膜泡运输
第四节 溶酶体与过氧化物酶体
第五节 细胞内蛋白质的分选与细胞结构的组装
?分泌蛋白合成的模型---信号假说
?蛋白质分选与分选信号
?膜泡运输
?细胞结构体系的组装
一、细胞质基质
（cytoplasmic matrix or cytomatrix）
细胞质基质是细胞的重要的结构成分，其 体积约占细胞质的一半
? 基本概念：
用差速离心法分离细胞匀浆物组分，先后除去细胞核、 线粒体、溶酶体、高尔基体和细胞质膜等细胞器或细胞结构 后，存留在上清液中的主要是细胞质基质的成分。生物化学 家多称之为胞质溶胶。
? 主要成分：中间代谢有关的数千种酶类、细胞质骨架结构。 ? 主要特点：细胞质基质是一个高度有序的体系；
通过弱键而相互作用处于动态平衡的结构体系。
? 完成各种中间代谢过程
如糖酵解过程、磷酸戊糖途径、糖醛酸途径等
? 蛋白质的分选与运输
? 与细胞质骨架相关的功能
维持细胞形态、细胞运动、胞内物质运输及能量传递等
? 蛋白质的修饰、蛋白质选择性的降解 ? 蛋白质的修饰
? 控制蛋白质的寿命
? 降解变性和错误折叠的蛋白质
? 帮助变性或错误折叠的蛋白质重新折叠，形成正确的分子构象
二、细胞内膜系统 （endomembrane system）
? 细胞内膜系统概述
? 细胞内膜系统的研究方法
细胞内膜系统概述
?细胞内膜系统是指细胞内在结构、功能及发生上相 关 的由膜包绕形成的细胞器或细胞结构。
?真核细胞细胞内的区域化（compartmentalization）： ?细胞骨架纤维为组织者的Cytomatrix形成 有序的动态结构；
?细胞内的膜相结构----细胞器（organelles）。
细胞内膜系统的研究方法
De Duve, A.Claude and G.Palade,1974 Nobel Plrize
? 放射自显影（Autoradiography）;
? 生化分析（Biochemical analysis）;
