2013年分子生物学试题
一、名词解释 1、Ribozyme核酶
2、Missense Mutation错义突变 3、Insulator绝缘子
4、RNA trans-splicing RNA反式剪接 5、Nucleotide excision repair 核苷酸切除修复 6、Transposon转座子 7、Dam methylase甲基化酶 8、spliceosome剪接体 9、core promoter核心启动子 10、SNP单核苷酸多态性 二、简答题
1、请简述真核生物mRNA的5’帽结构有何生物学功能？其缺失会造成什么后果？
2、某一基因开放阅读框中的一个碱基突变会对该基因编码产物产生怎样的影响？
3、请简述真核生物的mRNA和原核生物的mRNA有何不同。
4、请简述Ⅰ型内含子剪切过程。ORF中单个碱基改变对基因表达产物的影响
5、简述Western blot的原理和步骤。
三、论述题
1、研究基因功能通常是降低或者升高基因表达水平，请简要说出三种相关研究方法及原理。
2、mRNA和蛋白质的降解是一个有序的过程，其中microRNA和泛素起了非常重要的作用。请阐述microRNA的概念、产生过程、作用机制，或者泛素的概念和蛋白质泛素化的过程。（二者只需选择一种进行阐述）
3、某实验需要将1kb的cDNA片段插入某氨苄青霉素抗性的表达载体，在片段两端各有一个EcoRl位点，靠近5’端300bp的地方有一EcoRv位点，载体多克隆位点从5’端依次为BamHl，Hindllll，EcoRl，EcoRv和Xhol位点。 实验设计步骤如下：
（1） 用EcoRl处理载体，然后用碱性磷酸酶处理。
（2） 用EcoRl处理片段，然后与步骤（1）中的载体混合，加入DNA连接酶，在
适当的条件下使cDNA片段与载体连接。
（3） 连接产物转化到大肠杆菌，并在含有氨苄青霉素的LB平板上生长。 除此之外，还设了以下对照：
对照1：在含有抗生素的平板上涂布未被转化的大肠杆菌感受态细胞。
对照2：用未被酶切处理的载体转化大肠杆菌感受态细胞，并在含有抗生素的平板
上生长。
对照3：用EcoRl处理的载体，不用碱性磷酸酶处理，不加cDNA片段，然后加连
接酶做连接反应，并转化大肠杆菌感受态细胞，在含有抗生素的平板上生长。
对照4：除了用碱性磷酸酶处理外，其他同对照3。 某学生做了三次实验，结果如表：
实验1 对照1 对照2 对照3 对照4 实验组 请回答下列问题：
问题1：四个对照各有什么用？ 问题2：为什么要用碱性磷酸酶处理？
问题3：哪次实验数据比较合理，为什么？其他次实验失败的原因可能是为什么？ 问题4：设计实验鉴定克隆是否正确？
太多，无法计算 太多，无法计算 太多，无法计算 太多，无法计算 太多，无法计算 克隆数 实验2 0 0 0 0 0 实验3 0 大于1000 350 25 34
