综合运用当前国际上先进的基于核酸水平的外源转基因成分检测技术,通过DNA提取、Southern杂交试验、转基因结构的检测、外源基因拷贝数的检测等4项试验,从分子水平和生产角度上对转基因肉鸡进行了一次完整的安全检测分析,这一整套方法对生物食品的生产安全性进行了检测,取得了一次的成效。
中国食物与营养
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F o n t t n i hn o d a d Nu r i n C i a i o
转基因生物食品安全检测分析王文成(九江市产品质量监督检验所，江西九江 320 ) 30 0
摘
要：综合运用当前国际上先进的基于核酸水平的外源转基因成分检测技术，通过 D A提取、Suhr N ot n杂 e
交试验、转基因结构的检测、外源基因拷贝数的检测等 4项试验，从分子水平和生产角度上对转基因肉鸡进行了一
次完整的安全检测分析，这一整套方法对生物食品的生产安全性进行了检测，取得了一次的成效。关键词：转基因；食品安全；检测
转基因技术是一把双刃剑，牵扯到食品安全、生态环境安全等诸多问题。转基因技术打破了自然界的种属界限，由于转基因技术的特点，外源基因的性能结构尤其是病毒基因和抗生素抗性基因的使用，使得人们对转基因食品的安全性产生疑虑。由于目前应用的标记基因大多是抗生素基因，因此需要有全面的安全评价，以便消除安全隐患。 近些年转基因技术的迅速发展，给生物医药领域和农业领域带来了许多革命性的改变，与此同时也引起了一
粉状，加入到之前提取的液体中，振荡摇匀，于 7℃水 5浴 2- 3mn 0 -0 i。②添加 5 o LK C m l A,冰浴 3m n 4/ 0 i,℃时进行离心操作， 0rm,1mn 7 0p 0 0 i。③取上清，加入 02 .体积
的 1%C A ue,充分混匀， 5c 0 T BB f r f 7e水浴 1mn 0 i。④冷却后，加入等体积的氯仿/异戊醇抽提取 2次，室温离心 1 00p 5 i。⑤取上清，加入 2 3 1 0r m, mn/体积异丙醇，充分混匀，室温放置 5 i,室温离心， 0 m,5 i mn 60 r 0p mn。⑥去
上清， 7%乙醇洗涤沉淀 2次。⑦加 11体积 3 o L用 0/0 ml / NA (H . ) a C p 52,2倍体积无水乙醇混匀，_￣置 2 C放 0 1mn 0 i,离心 6 0 rm, mn 0 0 p 5 i,用 7%乙醇洗涤沉淀 2次， 0 抽干，加适量 T u e溶解，置-℃备用。 Ebf r f 2 02 3 4
系列的相关问题，比如转基因作物的食品安全问题以
及转基因作物对于生态环境的影响，
这就使得各国政府都对转基因食品安全加强了监控，并且试图通过制定完善的有关转基因食品安全的相关法律来控制。但是这些
法律的制定实施需要有较健全的转基因检测技术做支持，因此本文将从目前国际上先进的基于核酸水平的外源转
基因成分检测技术人手，对相关的转基因食品安全进行分析，重点讨论转基因动物的食品安全问题。图 1抽取的鸡 D A核酸检测 N
1转基因生物检测 1 1试验目的 .
注：1、2为转基因阳性鸡 D A,3 N、4为转基因阴性鸡 D A,5 N、6为普通鸡 D A N
2 1 l月，经过一年半的努力本实验室成功制备 00年 1出了具有一定价值的转基因鸡，作为肉鸡使用，平均重量较之普通鸡增大 1%左右，笔者对该品种鸡进行转基因 5
图1为抽取的鸡 D A,经过核酸检测，OY 0 20的 N I 6/8 2比值均在 1— 1 . 7 . 9之间，符合要求，D A含量在 3D N O一1 10 g 。 0 n/
检测，以便为后续的食品安全评价提供支持。1 2 DN . A提取
1 3转基因结构的检测 .
外源基因的安全性与外源基因所表达的蛋白、转入
对转基因肉鸡进行基因检测之前需要对 D A进行提 N取，该步骤相对简单，去肉鸡部分组织，具体步骤如下。
基因的来源等密切相关。尤其是那些来源于细菌、病毒和带有抗生素抗性标记基因等均有潜在的危害性，所以需要对其进行结构检测。为此，采用单一 P R检测的方 C法来测定结构。试验所采用的引物采购自 Sn o agn公司。
①称取 l鸡肌肉组织，液氮研磨，在研磨的过程中 g加入 DE A。在 7℃水浴中提取液体 5 L 1C (】 m,研磨成均匀作者简介：王文成 ( 9 1 17一
),男，江西九江，本科，工程师，研究方向：品检测，食品开发。食
