生物化学实验
多酚氧化酶( 实验一 多酚氧化酶(PPO)活性测定 )末端氧化酶：处于生物氧化一系列反应的最末端， 末端氧化酶：处于生物氧化一系列反应的最末端， 把电子传递给O 的酶。 把电子传递给 2的酶。 1、细胞色素氧化酶 、 2、交替氧化酶 、 3、酚氧化酶 分为单酚氧化酶和多酚氧化酶。 多酚氧化酶。 、酚氧化酶: 分为单酚氧化酶和多酚氧化酶 4、乙醇酸氧化酶 、 5、抗坏血酸氧化酶 、
生物化学实验
一、实验目的： 实验目的： 掌握测定多酚氧化酶活性的方法； 掌握测定多酚氧化酶活性的方法；了解多酚氧化酶的特性 实验原理： 二、实验原理： 多酚氧化酶是一种含铜的氧化酶， 多酚氧化酶是一种含铜的氧化酶，能使一元酚和二元酚氧化 生成醌。醌有颜色， 下有最大光吸收， 生成醌。醌有颜色，在525nm下有最大光吸收，通过分光光 下有最大光吸收 度法测定反应体系颜色变化可测定酶活性。 度法测定反应体系颜色变化可测定酶活性。 三、器材与试剂 1、仪器：低温离心机、s22pc分光光度计 、仪器：低温离心机、 分光光度计 2、试剂：儿茶酚、pH 7.2磷酸缓冲液 、试剂：儿茶酚、 磷酸缓冲液 3、材料：马铃薯 、材料：
生物化学实验
四、实验步骤： 实验步骤： 1.称取马铃薯 克，加入 磷酸缓冲液， .称取马铃薯0.5克 加入2.5mL pH 7.2磷酸缓冲液，少许 磷酸缓冲液 PVP,研磨匀浆，转移到离心管，再用 ，研磨匀浆，转移到离心管，再用2.5mL pH 7.2磷酸缓 磷酸缓 冲液冲洗研钵，合并提取液。 ℃ 离心15分钟 冲液冲洗研钵，合并提取液。4℃ 5000rpm离心 分钟，上 离心 分钟， 清液即为粗酶液。 清液即为粗酶液。 2.在试管中，加入 磷酸缓冲液， .在试管中，加入2.5mL pH 7.2磷酸缓冲液，1.5mL 儿茶酚 磷酸缓冲液 以及1mL 粗酶液，空白调零以 粗酶液，空白调零以1mL磷酸缓冲液代替粗酶液。 磷酸缓冲液代替粗酶液。 以及 磷酸缓冲液代替粗酶液 3.A值测定：加入粗酶液后迅速混匀，立刻于 值测定： . 值测定 加入粗酶液后迅速混匀，立刻于525nm下测定 下测定 反应体系的A值 每隔30秒记录一次 共记录5次 秒记录一次， 反应体系的 值，每隔 秒记录一次，共记录 次。 4.计算酶活力。按下式计算 .计算酶活力。 PPO活性=U/min gFW 活性= 活性 A值增加 值增加0.001定义为一个酶活力单位。 定义为一个酶活力单位。 值增加 定义为一个酶活力单位
生物化学实验
五、实验报告： 实验报告： 计算所测材料的PPO活性。选择A值变化均匀的三组数 活性。选择 值变化均匀的三组数 计算所测材料的 活性 值求平均值。 值求平均值。
